Objetivo

    Ofrecer a organismos públicos y privados un servicio externo de evaluación farmacológica, que responda eficazmente a sus necesidades de evaluación de la actividad biológica de fármacos y moléculas en desarrollo, así como de validación de nuevas dianas farmacológicas en el descubrimiento de nuevos fármacos.

Campos de aplicación

• Moléculas activas sobre el sistema nervioso central, especialmente dirigidas a la depresión, la ansiedad, la psicosis y el  dolor.
• Inflamación, especialmente neuroinflamación.
• Oncología.
• Resistencia a antibióticos.
• Toxicidad y teratogenia.

Personal técnico y científico

    Nuestro equipo técnico se encuentra familiarizado con el uso de estas tecnologías, tanto en el manejo de las plataformas, como con el empleo de los programas informáticos de diseño, lectura de resultados, análisis e interpretación.
    Nuestro personal científico está formado por expertos a nivel internacional en las distintas áreas de aplicación propuestas (psicofarmacología, dolor, cáncer, neurodesarrollo).

Instalaciones y equipos

• Laboratorios de cultivos celulares.
• Estabulario SPF dotado de instalaciones para procedimientos quirúrgicos y laboratorios de conducta equipado con un sistema computarizado de video-análisis y tracking (ANY-MAZE).
• Instalaciones radiactivas para emisores beta y gamma, con equipos de Harvester para placa y tubo y contadores de centelleo.
• Servicio de microscopia dotado con los equipos y el soporte técnico necesarios para realizar experimentos de microscopía avanzados (epifluorescencia, confocal, contraste de fases y Normarski, FRAT, FRET, etc.), tanto en muestras fijadas como en célula viva. http://www.unican.es/ibbtec/Servicios/servicio-de-microscopia-optica-avanzada.htm
• Unidad de electrofisiología in vivo e in vitro.
• Equipos de PCR convencional y de tiempo real (AB 2720, Verity, ABI 7500, Stepone).
• Equipos de western blot (BioRad). Sistema de documentación y cuantificación de geles y blots mediante quimioluminiscencia (Iquant Capture 350) y fluorescencia (Odissey).
• Equipos de microdiálisis.
• Detectores de colorimetría, fluorescencia, fluorescencia polarizada, BRET y AlphaScreen® (Mithras LB 940 Multimode Microplate Reader y Victor3).
• Robot de manejo de líquidos Biomek3000 (Beckman Coulter).

Servicios ofertados

Ensayos farmacológicos in vivo en roedores

• Silenciamiento génico in vivo mediante siRNAs aplicados en regiones cerebrales específicas.
• Ensayos farmacológicos en animal naive y modelos animales de:
  • Patología psiquiátrica: depresión, ansiedad o psicosis.
  • Dolor (agudo y crónico): dolor neuropático, formalina o carragenina.
  • Modelos genéticos por déficit y sobreexpresión de proteínas.
  • Modelos animales de tumores: xenoinjertos de células tumorales.
• Test conductuales
  • Test de Irwing, rota-rod, actividad locomotora, campo abierto.
  • Laberinto en cruz, Novelty supressed feeding, test de las canicas, Ligh-Dark box.
  • Test de la natación forzada, suspensión de la cola, preferencia de sucrosa, Splash, interacción social.
  • Miedo condicionado y laberinto en T.
  • Test de dolor agudo (placa caliente, tail-flick) y crónico (alodinia e hiperalgesia).

Ensayos farmacológicos in vivo en embrión de pollo

• Evaluación de los efectos sobre el desarrollo embrionario.
• Evaluación de viabilidad, teratogénesis y/o toxicidad (estudios morfológicos y moleculares).
• Administración de fármacos en diferentes estadios del desarrollo embrionario. La administración puede realizarse en la cavidad sub-blastodérmica, en el saco amniótico o sobre el saco amniótico, sobre la membrana corio-alantoidea, en el vitelo. El fármaco puede administrarse mediante inyección o localmente, en microesferas.

Ensayos electrofisiológicos in vivo e in vitro

• Valoración de la actividad eléctrica de neuronas serotonérgicas del núcleo dorsal del rafe.
• Valoración de la actividad eléctrica de neuronas nociceptivas de la médula espinal.
• Registros en rodajas de hipocampo de células piramidales, LTP y LTD.

Ensayos farmacológicos ex vivo en cultivos de rodaja de cerebro (cultivos organotípicos)

• Estudios de neuroinflamación.
• Estudios de infección.
• Estudios de expresión génica en respuesta a tratamiento farmacológico.

 

 

 

Ensayos farmacológicos in vitro

• Estudios de receptores:
  • Fijación de radioligandos en membranas (celulares y tisulares) y secciones de tejidos: Evaluación de afinidad, selectividad, potencia y eficacia de ligandos y localización de nuevas dianas.
  • Análisis de activación y selectividad funcional de GPCRs.
  • Caracterización farmacológica y funcional de nuevas moléculas sobre heterodimeros de GPCRs.
  • Cuantitativa de procesos de endocitosis de receptores tras su activación por fármacos agonistas.
• Análisis de activación de cascadas de señalización celular
  • Determinación de segundos mensajeros (AMPc, IP3, Ca2+).
  • Vía de MAP cinasas.
  • AMPc/PKA/CREB.
  • PI3K/AKT/mTOR.
  • BDNF/TrkB.
  • Wint/β-catenina.
    
• Estudios de expresión génica: PCR a tiempo real e hibridación in situ.
• Estudios de expresión de proteínas: western blot, inmunohistoquímica/inmunofluorescencia, neurogénesis y diferenciación celular en hipocampo.
• Estudios de proliferación y diferenciación en células progenitoras de hipocampo.
• Estudios de actividad antiproliferativa y de diferenciación en líneas derivadas de tumores.
• Evaluación  de viabilidad celular y toxicidad de compuestos en líneas celulares humanas y animales.
• Generación de líneas celulares estables para la expresión heteróloga de receptores de forma permanente o inducible.

Ensayos farmacogenéticos

• Expresión de SNP de proteínas diana y valoración de la respuesta funcional a fármacos.

 

 

 

Inhibidores de la conjugación bacteriana (COINs)

• Búsqueda sistemática de compuestos capaces de inhibir la conjugación de plásmidos responsables de la diseminación de resistencias a antibióticos, para combatir patógenos multirresistentes en ecosistemas industriales (piscifactorías, granjas, etc.) y hospitalarios.
• Como modelo de estudio utilizamos Escherichia coli, portadora de diferentes plásmidos modelo que poseen marcadores fluorescentes.
• El método de estudio se basa en la conjugación bacteriana en presencia de diferentes compuestos, mediante la detección de los plásmidos fluorescentes en las bacterias receptoras.
• Financiado por el proyecto del VII Programa Marco de la UE titulado “Evolution and transfer of antibiotic resistance” (EVOTAR) (Project no. 282004/FP7-HEALTH 2011.2.3.1-2).